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发布日期:2025/11/7 13:08:00

在心血管疾病、肿瘤生物学及细胞发育等研究领域,清晰、准确地观察细胞形态结构是至关重要的研究基础。麦胚凝集素(Wheat Germ Agglutinin, WGA)染色实验作为该领域的经典技术,凭借高特异性与可视化优势,成为科研人员的重要工具。

一、什么是WGA实验?

WGA实验是一种基于麦胚凝集素的荧光染色技术。麦胚凝集素是一种从小麦胚芽中提取的植物凝集素,能够特异性地与细胞膜表面的N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和唾液酸等糖基残基结合。通过荧光染料(如iFluor 488)标记的WGA进行染色,可以在荧光显微镜下清晰勾勒出细胞的轮廓,从而用于细胞形态学分析、细胞边界识别以及细胞间相互作用的观察。

二、WGA实验的应用场景

1、心肌细胞研究:特异性标记心肌细胞膜,用于评估心肌肥大等病理状态下细胞直径、面积及形态的变化,是心血管疾病研究的经典工具。

2、肿瘤细胞生物学:清晰显示肿瘤细胞的边界,用于研究肿瘤细胞的侵袭、转移以及肿瘤微环境中细胞与基质的相互作用。

3、神经科学研究:标记神经元细胞膜,有助于观察神经元的形态、突触结构以及神经网络的构建。

4、细胞计数与定位:为流式细胞术或高内涵成像系统提供清晰的细胞膜信号,辅助进行准确的细胞计数和空间定位。

三、WGA实验的原理

实验原理在于WGA与细胞膜糖蛋白/糖脂的特异性结合。将iFluor 488等荧光基团共价连接到WGA分子上,形成的复合物即可作为高亲和力的探针。当该探针与样本孵育时,会精确地结合在细胞膜表面,经洗涤去除未结合的探针后,在特定波长的激发光下,细胞膜便会发出明亮的荧光,从而实现细胞形态的可视化。

四、慧蓝生物 iFluor 488-WGA染色试剂盒:科研级解决方案

上海慧蓝生物推出的iFluor 488-WGA染色试剂盒(货号: RC0035-A),为您提供了一站式、高性能的细胞膜染色方案。

 

 

【产品核心优势】

  1. 高亮度与光稳定性:采用优质的iFluor 488荧光染料,信号明亮,抗淬灭能力强,为您争取更充裕的成像时间。

  2. 卓越的特异性:高纯度WGA确保了对细胞膜的特异性结合,背景染色低,结果清晰可靠。

  3. 即用便捷:试剂盒内含的iFluor 488-WGA染色液、DAPI核染色液及抗荧光淬灭封片剂均为即用型,简化操作流程,节省宝贵时间。

  4. 广泛的样本兼容性:适用于石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片乃至活细胞等多种样本类型,满足您不同的实验需求。

  5. 完整的解决方案:试剂盒提供从膜染色(绿色)、核复染(蓝色)到封片的全套试剂,无需额外购买。

五、实验流程

以石蜡切片为例,主要实验流程如下:

  1. 样本准备与脱蜡水化:按标准流程对石蜡切片进行脱蜡和梯度乙醇水化。

  2. 抗原修复:建议使用pH 9.0的EDTA修复液进行热修复,以暴露最佳的WGA结合位点。

  3. WGA染色:滴加iFluor 488-WGA染色液,37℃避光孵育30分钟至2小时。

  4. DAPI复染核:使用试剂盒内提供的DAPI染液对细胞核进行复染,室温避光孵育5-20分钟。

  5. 封片与镜检:使用试剂盒内的抗荧光淬灭封片剂(RC06)封片,随后在荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察。iFluor 488-WGA标记的细胞膜呈绿色,DAPI标记的细胞核呈蓝色。

注意:对于活细胞染色,可省略固定步骤直接染色。为避免细胞内结构(如高尔基体)的非特异性染色,细胞样本染色前不建议使用通透液处理。

 

【慧蓝生物WGA染色示例图】

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