原理介绍:一抗识别抗原,hrp标记二抗识别一抗,hrp催化中间体TY永久性标记抗原且实现信号放大,红色色原特异性识别TY产物 (共价结合),从而实现了红色信号的累积,完成了红色显色.常规免疫组化染色用DAB,形成棕色物质。DAB棕色+红色,形成了独特的组化双染颜色,该组化双染信号可以中性树胶封片,不同于传统的 碱性磷酸酶 AEC或AP-red等红色信号(不能中性树胶封片)。
试剂盒组成(100T):
名称
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货号
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规格
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保存条件
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TY原液(100x)
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RCF040-1A
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60μl
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4℃
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TY稀释液
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RCF040-1B
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6mL
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4℃
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PB
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RCF040-2
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10mL
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-20℃
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AC
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RCF040-3
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1.2mL
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-20℃
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CU
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RCF040-4
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500μl
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-20℃
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红色色原
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RCF040-5
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100μl
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-20℃
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DAB原液(100x)
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RCD002-A
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60μl
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4℃
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DAB稀释液
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RCD002-B
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6mL
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4℃
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高敏多聚体hrp抗兔鼠二抗
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RCB054
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10mL
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4℃
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抗体稀释液
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RC01
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20mL
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4℃
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3%过氧化氢
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RC012
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20mL
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4℃
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*红色显色使用方法: hrp二抗孵育完了之后,加入即用型TY反应 20min左右,然后PBS洗三次,之后加入红色显色液工作液(PB:CU:AC:红色色原=86:4:10:1),反应15分钟以上(以上试剂使用之前注意解冻恢复为液体状态,使用前混匀离心)
其他自备试剂:PBS,修复液,苏木素等
石蜡切片免疫组化双染结果判读:
苏木素染细胞核为蓝色,第一指标DAB显出的阳性表达为棕黄色,第二指标红色显色的阳性表达为红色或粉红色。