产品简介:本产品是基于鲁米诺底物的增强型化学发光检测试剂盒,专为Western Blot中的HRP(辣根过氧化物酶)标记物设计。在氧化反应过程中,试剂发出高强度信号,通过X光胶片或化学发光成像系统即可检测。本产品具有灵敏度适中、信号稳定、背景低的特点,适用于常规丰度蛋白的检测。
产品货号:HL-B-201
规格:100ml/500ml
有效期:12个月
试剂盒组成:
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名称
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货号
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规格(100ml)
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规格(500ml)
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保存条件
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普通型ECL A液
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HL-B-201A
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50ml
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250ml
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4℃避光
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普通型ECL B液
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HL-B-201B
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50ml
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250ml
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4℃避光
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操作步骤
1、准备工作:在进行Western Blot二抗孵育及充分洗涤后(建议使用TBST洗涤3次,每次5分钟),准备进行显色。
2、工作液配制:吸取等体积的A液和B液(例如各取1 mL),充分混匀。建议现配现用,在室温下放置超过1小时可能影响信号强度。
3、孵育:将配好的工作液均匀覆盖在PVDF膜或NC膜的表面(通常每平方厘米膜需0.1 mL工作液),室温静置孵育1-2分钟。
4、检测:
胶片压片:用滤纸吸去膜边缘多余液体,用保鲜膜包裹,置于暗盒中。在暗室中压上X光胶片,曝光时间通常为30秒至5分钟(根据信号强弱调整)。
成像系统:放入化学发光成像仪中,根据信号强度选择“自动曝光”或手动设定曝光时间。
注意事项
1、使用洁净的镊子和手套操作,避免灰尘和汗渍污染导致高背景。
2、抗体浓度过高可能导致高背景或非特异性条带。
3、如果背景较高,请确保洗涤充分(增加TBST洗涤次数或时间)。
4、本试剂无毒性,但建议实验时佩戴实验服和手套,避免皮肤直接接触。
5、试剂2°C - 8°C避光保存。切勿冷冻,冷冻会导致灵敏度急剧下降或试剂失效。