一、原理
糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色液不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。
试剂盒货号:RC0064
试剂盒规格:20ml×3
有效期:一年
二、试剂盒组成
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组分
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剂量
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保存条件
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PAS染色液A
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20mL
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4℃
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PAS染色液B
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20mL
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4℃
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PAS染色液C
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20mL
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4℃/RT
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注:A液维高碘酸溶液,B液为Schiff试剂,C液为苏木素染液
三 染色操作流程
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-95%乙醇5min-85%乙醇5min-75%乙醇5min,蒸馏水洗。
2、切片画圈后滴加液高碘酸溶液,室温染色8-15min,经纯水浸洗3次,每次约10s。
3、切片滴加Schiff试剂避光染色20-30min,流水冲洗5 min。
4、切片滴加苏木素染液染色30s-2min,自来水洗。然后切片经分化液分化3s,自来水洗;自来水洗数分钟反蓝。
5、将切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min --无水乙醇Ⅰ6min -无水乙醇Ⅱ6min -二甲苯Ⅰ5min 中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。
四 结果
糖原、中性粘液物质、软骨基质、植物的真菌和细胞壁、上皮的基膜等均呈紫红色,细胞核蓝色。