1.按照常规免疫组化或者TSA免疫荧光步骤，组织切片经脱蜡、抗原修复、双氧水封闭、血清或者BSA封闭、一抗 孵育后，PBS洗三次，每次5min。

2.二抗孵育：每张切片上滴加50-100 μL 即用型高敏多聚HRP二抗完全覆盖组织，室温孵育30-60min，PBS洗三 次，每次5min。

3.DAB或者TSA荧光染料显色：每张切片上滴加50-100 μL DAB或者TSA工作液，室温孵育数分钟，显色完成后PBS 或者纯水冲洗终止显色，PBS洗三次，每次5min。

4.细胞核复染：苏木素或者DAPI复染细胞核。

5.封片：组化切片按常规步骤经梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，荧光切片用抗荧光淬灭封片剂封片。

1.此高敏HRP二抗为即用型二抗，使用前不用稀释。

2.每张切片抗体使用量根据组织大小均匀覆盖组织为宜。

3.二抗4度保存，避免冷冻结冰。

4.抗体孵育时间及DAB显色时间应根据预实验来摸索合适的实验条件。