原理介绍:
考马斯亮蓝染色(简称考染)是一种基于染料考马斯亮蓝R250的常用蛋白质检测方法。该技术主要用于对SDS-PAGE或非变性PAGE蛋白电泳后的凝胶进行染色与脱色,以显示蛋白质条带。此外,它也可用于检测Western Blot转膜后凝胶上残留的蛋白质,是实验室中便捷、经济的蛋白可视化分析手段。
实验流程:
蛋白提取-制胶-电泳-染色-脱色-结果分析
送样运输要求:
新鲜组织、细胞沉淀、蛋白溶液,干冰运输。
样本送样及运输要求:
贴壁细胞标本收集(无RIPA裂解液):
1、用胰酶消化细胞,使细胞分散开。
2、3000rpm离心,收集细胞沉淀,PBS清洗1-2次,吸干净残余PBS,干冰运输。
悬浮细胞标本收集:
1、3000rpm离心10min,弃上清,PBS清洗1-2次,收集细胞沉淀,吸干净残余PBS,干冰运输。
组织样本:
1、组织样本,离体后尽快冻存。
2、有条件的话,最好先将样本在液氮中速冻,再转入-80℃冰箱中保存。
3、对于心肝脾肾等组织可每50~100mg加1ml裂解液,肺100~200mg加1mg裂解液。加入裂解液前,尽量将组织剪成小块。
4、少量指标,组织需要提供的样本量要求50mg或更多。